Produkter

Effekter av vaskemidler på P-glykoproteinatpaseaktivitet: forskjeller i forstyrrelser av basal- og verapamilavhengige aktiviteter.

P-glykoprotein (P-gp), et plasmamembranglykoprotein assosiert med multimedikamentresistensfenotypen, er ansvarlig for den ATP-avhengige utstrømningen av forskjellige amfifile legemidler.Ved å bruke membranvesikler fremstilt fra den multiresistente cellelinjen DC-3F/ADX, studerte vi forstyrrelsen av basal (dvs. i fravær av medikament) og verapamil-avhengige P-gp ATPase-aktiviteter indusert av forskjellige vaskemidler, ved ikke-solubilisering, så vel som ved solubilisering, konsentrasjoner.Den progressive membransolubiliseringen med økende vaskemiddelkonsentrasjon ble overvåket ved lysspredning og sentrifugeringseksperimenter.For ikke-oppløseliggjørende vaskemiddelkonsentrasjoner induserte alle testede vaskemidler unntatt DOC en delvis hemming av P-gp ATPase-aktivitet, som ikke var korrelert med mengden av de forskjellige testede vaskemidlene inkorporert i membranene.Analyse av den verapamil-induserte P-gp-aktiveringen avslører at P-gp ATPase-aktivitet er forskjellig modulert av de forskjellige vaskemidlene ved ikke-oppløseliggjørende konsentrasjoner.Det er derfor mer sannsynlig at spesifikke interaksjoner mellom P-gp og vaskemidler oppstår i stedet for en global membranforstyrrelse.Etter oppløseliggjøring av de forskjellige testede vaskemidlene ble den basale P-gp ATPase-aktiviteten praktisk talt fullstendig hemmet, bortsett fra i nærvær av CHAPS som var i stand til å bevare denne aktiviteten på et nivå som var sammenlignbart med det målt i native membraner.Imidlertid gikk den verapamil-induserte P-gp ATPase-aktiveringen tapt under P-gp-solubilisering av CHAPS, men gjenopprettet etter fortynning av CHAPS under dens kritiske micellære konsentrasjon.Disse observasjonene indikerer spesifikke interaksjoner mellom P-gp- og CHAPS-molekyler i de blandede micellene.I det hele tatt er dataene våre som viser spesifikke interaksjoner P-gp/detergenter i samsvar med plasseringen av medikamenttransportstedene på P-gp transmembrane domener.