4-nitrofenyl-alfa-L-fukopyranosid CAS:10231-84-2 Hvitt til blekgult krystallinsk pulver
Katalognummer | XD90253 |
Produktnavn | 4-nitrofenyl-alfa-L-fukopyranosid |
CAS | 10231-84-2 |
Molekylær formel | C12H15NO7 |
Molekylær vekt | 285,25 |
Oppbevaringsdetaljer | 2 til 8 °C |
Harmonisert tariffkode | 29400000 |
Produkt spesifikasjon
Løselighet | Klar, fargeløs løsning |
Assay | 99 % |
Utseende | Hvitt til blekgult krystallinsk pulver |
TLC | Enkelt sted |
Renhets-HPLC | Min 98 % |
Måten effekter av samtidige mutasjoner kombineres for å endre enzymaktivitet er ikke lett forutsigbar fordi disse effektene ikke alltid er additive på en lineær måte.Derfor kan karakteriseringen av effektene av samtidige mutasjoner av aminosyrerester som binder substratet gi et betydelig bidrag til forståelsen av substratspesifisiteten til enzymer.I beta-glykosidasen fra Spodoptera frugiperda (Sfbetagly) samhandler begge rester Q39 og E451 med substratet, og dette er avgjørende for å definere substratspesifisitet.Doble mutanter av Sfbetagly (A451E39, S451E39 og S451N39) ble fremstilt ved stedsrettet mutagenese, uttrykt i bakterier og renset ved bruk av affinitetskromatografi.Disse enzymene ble karakterisert ved å bruke p-nitrofenyl beta-galaktosid og p-nitrofenyl beta-fucosid som substrater.K cat/Km-forholdet for enkle og doble mutanter av Sfbetagly inneholdende stedsrettede mutasjoner i posisjonene Q39 og E451 ble brukt for å demonstrere at effekten på den frie energien til ESdouble dolk (enzym-overgangstilstandskompleks) av dobbeltmutasjonene (Gdouble) daggerxy) er ikke summen av effektene som følge av enkeltmutasjonene (Gdouble daggerx og Gdouble daggery).Denne forskjellen i Gdouble dolk indikerer at effekten av enkeltmutasjonene delvis overlapper hverandre.Derfor teller denne vanlige effekten bare én gang i Gdouble daggerxy.Krystallografiske data på beta-glykosidaser viser tilstedeværelsen av en bidentat hydrogenbinding som involverer restene Q39 og E451 og den samme hydroksylgruppen på substratet.Derfor tyder både termodynamiske og krystallografiske data på at rester Q39 og E451 utøver en gjensidig innflytelse på deres respektive interaksjoner med underlaget.