Produkter

Vi utviklet et nytt lite interfererende RNA (siRNA) leveringssystem ved å bruke et ternært kompleks med polyetylenimin (PEI) og γ-polyglutaminsyre (γ-PGA), som viste lyddemping og ingen cytotoksisitet.De binære kompleksene av siRNA med PEI var omtrent 73-102 nm i partikkelstørrelse og 45-52 mV i ζ-potensial.Den lyddempende effekten av siRNA/PEI-komplekser økte med en økning av PEI, og siRNA/PEI-komplekser med et ladningsforhold større enn 16 viste signifikant luciferase-knockdown i en muse-kolonkarsinomcellelinje som regelmessig uttrykker luciferase (Colon26/Luc-celler).Imidlertid ble sterk cytotoksisitet og blodagglutinasjon observert i siRNA/Lipofectamine-komplekset og siRNA/PEI16-komplekset.Å lade kationiske komplekser med en anionisk forbindelse ble rapportert å være en lovende metode for å overvinne disse toksisitetene.Vi forberedte derfor ternære komplekser av siRNA med PEI (ladningsforhold 16) ved tilsetning av γ-PGA for å redusere cytotoksisitet og levere siRNA.Som forventet avtok cytotoksisiteten til de ternære kompleksene med en økning av γ-PGA-innholdet, noe som reduserte ζ-potensialet til kompleksene.En sterk dempende effekt som kan sammenlignes med siRNA/lipofektaminkompleks ble oppdaget i ternære komplekser inkludert y-PGA med en anionisk overflateladning.Den høye inkorporeringen av ternære komplekser i Colon26/Luc-celler ble bekreftet med fluorescensmikrokopi.Etter å ha oppnådd knockdown av et eksogent transfektert gen, ble kompleksets evne til å mediere knockdown av et endogent husholdningsgen, glyceraldehyd-3-fosfatdehydrogenase (GAPDH), vurdert i B16-F10-celler.Det ternære komplekset (siRNA/PEI16/γ-PGA12-komplekset) viste en betydelig GAPDH knockdown-effekt.Dermed utviklet vi et nyttig siRNA-leveringssystem.