Produkter

1. Metabolittprofileringsmetoder er viktige verktøy for måling av metabolittbassenger i biologiske systemer.Mens de fleste metabolittprofileringsmetoder rapporterer relative intensiteter eller er avhengige av noen få interne standarder som representerer alle metabolitter, er det ultimate kravet for en kvantitativ beskrivelse av metabolittpoolen i biologiske celler og væsker absolutt konsentrasjonsbestemmelse.Vi rapporterer her en høyhastighets og sensitiv gasskromatografi/tandem massespektrometri (GC/MS/MS) målrettet metabolittprofileringsmetode som muliggjør absolutt kvantifisering av alle påviste metabolitter.Metoden er basert på metylklorformiatderivatisering og kvantifisering ved å spike prøver med metabolittstandarder separat derivatisert med deutererte derivatiseringsreagenser.Den tradisjonelle elektronpåvirkningsioniseringen erstattes med positiv kjemisk ionisering siden sistnevnte i mye større grad bevarer det molekylære ionet og andre høymolekylære fragmenter.Dette gjorde det lettere å velge unike MS/MS-overganger blant de mange coeluerende metabolittene.For tiden omfatter den nye GC/MS/MS-metoden 67 vanlige primærmetabolitter, hvorav de fleste tilhører gruppene av amino- og ikke-aminoorganiske syrer.Vi viser metodens anvendelighet på urin- og serumprøver.Metoden er en betydelig forbedring av dagens metodikk for kvantitativ GC/MS-metabolittprofilering av aminosyrer og ikke-aminoorganiske syrer.

2.24S-hydroksykolesterol (24OHC) og 27-hydroksykolesterol (27OHC) er to strukturelt like oksysteroler av ulik opprinnelse - førstnevnte dannes nesten utelukkende i hjernen og sistnevnte dannes i mindre grad i hjernen enn i de fleste andre organer.HYPOTESE SOM SKAL TESTES: Nevronal skade og/eller demyelinisering forårsaker økt fluks av 24OHC fra hjernen til cerebrospinalvæsken (CSF), mens en defekt blod-hjernebarriere forårsaker økt fluks av 27OHC fra sirkulasjonen inn i CSF. Isotopfortynningsmasse Spektrometri ble brukt til å analysere de to oksysterolene i CSF og plasma fra mer enn 250 pasienter med forskjellige nevrologiske og geriatriske sykdommer. CSF-nivåene til de to oksysterolene var mye mer påvirket av de forskjellige sykdommene enn plasmanivåene.Pasienter med aktive demyeliniserende sykdommer hadde økte nivåer av 24OHC i CSF med et relativt høyt 24OHC/27OHC-forhold.Pasienter med meningitt generelt hadde høye nivåer av begge steroidene med lavt 24OHC/27OHC-forhold.Pasienter med Alzheimers sykdom hadde litt økte nivåer av 24OHC i CSF med mindre økning i 27OHC.Pasienter med multippel sklerose hadde en tendens til å ha høyere nivåer av 24OHC i aktive perioder med et høyt 24OHC/27OHC-forhold. Målinger av de to oksysterolene i CSF og plasma kan gi betydelige bidrag til eksisterende biokjemiske metoder for evaluering av nevrologiske sykdommer.