Produkter

Karbamoylfosfatsyntetase 1 (CPS1)-mangel på grunn av CPS1-mutasjoner er en sjelden autosomal-recessiv ureasyklusforstyrrelse som forårsaker hyperammonemi som kan føre til død eller alvorlig nevrologisk svekkelse.CPS1 katalyserer karbamoylfosfatdannelse fra ammoniakk, bikarbonat og to molekyler ATP, og krever den allosteriske aktivatoren N-acetyl-L-glutamat.Kliniske mutasjoner forekommer i hele CPS1-kodende regionen, men hovedsakelig i enkeltfamilier, med lite tilbakefall.Vi karakteriserte her den eneste kjente tilbakevendende CPS1-mutasjonen, p.Val1013del, funnet i elleve ubeslektede pasienter av tyrkisk avstamning ved bruk av rekombinant His-merket villtype eller mutant CPS1 uttrykt i baculovirus/insektcellesystem.Den globale CPS1-reaksjonen og ATPase- og ATP-syntesedelreaksjonene som reflekterer henholdsvis bikarbonat- og karbamatfosforyleringstrinnene, ble analysert.Vi fant at CPS1 villtype og V1013del mutant viste sammenlignbare ekspresjonsnivåer og renhet, men mutanten CPS1 viste ingen signifikante gjenværende aktiviteter.I CPS1-strukturmodellen tilhører V1013 en svært hydrofob β-streng i midten av det sentrale β-arket til A-underdomenet til karbamatfosforyleringsdomenet og er nær den forutsagte karbamattunnelen som forbinder begge fosforyleringsstedene.Haplotypestudier antydet at p.Val1013del er en grunnleggermutasjon.Som konklusjon inaktiverer mutasjonen p.V1013del CPS1, men gjør ikke enzymet grovt ustabilt eller uløselig.Gjentakelse av denne spesielle mutasjonen hos tyrkiske pasienter skyldes sannsynligvis en grunnleggereffekt, som er i samsvar med den hyppige slektskapen observert i den berørte befolkningen.