ONPG CAS:369-07-3 98,0% Min White To Off -White Pulver
Katalognummer | XD90006 |
CAS | 369-07-3 |
Produktnavn | ONPG(2-nitrofenyl-beta-D-galaktopyranosid) |
Molekylær formel | C12H15NO8 |
Molekylær vekt | 301,25 |
Oppbevaringsdetaljer | 2 til 8 °C |
Harmonisert tariffkode | 29400000 |
Produkt spesifikasjon
Renhet (HPLC) | Min.98,0 % |
Utseende | Hvitt til off-white pulver |
Løsning(1 % i vann) | Klar, fargeløs til svakt gul løsning |
Vanninnhold(Karl Fisher) | Maks.0,5 % |
Spesifikk optisk rotasjon [α]D20(c=1, H2O) | -65,0 °C til -73,0 °C |
Diskusjon om ONPG-test (β-galaktosidase-test)
Spørsmål har blitt stilt ofte i det siste: 1. Hvorfor kan ONPG-testen brukes til å skille ut forsinket laktosefermentering?2. Hvorfor sier den nasjonale standarden at det er nødvendig å bruke 3 % natriumkloridtrisakkaridjern (eller trisakkaridjern) for ONPG-testen?3. For Vibrio parahaemolyticus, når man utfører OPNG-test, hvorfor bør toluen tilsettes dråpevis i henhold til standarden?Hva er funksjonen?
Vårt firma har gjennomgått mye informasjon, oppsummert den og delt den med deg nedenfor:
Prinsipp: Det kinesiske navnet på ONPG er o-nitrobenzen-β-D-galaktopyranosid.ONPG kan hydrolyseres til galaktose og gul o-nitrofenol (ONP) av β-galaktosidase, slik at aktiviteten til β-galaktosidase kan påvises ved fargeendring av kulturmediet.
Laktose er et sukker som de fleste mikroorganismer trenger å oppdage.Dens metabolisme krever to enzymer, den ene er cellepermease, laktose kommer inn i celler under påvirkning av permease;den andre er β-galaktosidase, som hydrolyserer laktose til galaktose.Laktose og glukose.β-Galaktosidase kan også direkte virke på ONPG for å hydrolysere den til galaktose og gul o-nitrofenol (ONP).Det kan gjøres på 24 timer, selv med laktoseforsinkede fermentorer.Derfor forklarer den observasjonsresultatene ved å plukke kultur 1 fra agarskråningen og inokulere den i en hel sirkel ved 36 °C i 1-3 timer og 24 timer.Hvis det produseres β-galaktosidase, vil den gulne i løpet av 1-3 timer, hvis det ikke finnes et slikt enzym, vil den ikke endre farge på 24 timer.
I henhold til de to ovennevnte enzymene kan mikroorganismer deles inn i følgende kategorier:
1 laktose-fermenterende (18-24 timer) bakterie med permease og β-galaktosidase P + G +;
2 Forsinkede laktosefermentorer (tar mer enn 24 timer) som mangler permease, men har galaktosidase: P-G+.
3 ikke-laktosefermentorer som mangler både permease og galaktosidase: P-G-.
ONPG-testen kan brukes til å skille laktose-lag-fermenterende bakterier (P-G+) fra ikke-fermenterende laktosebakterier (PG-), som:
1 Skille sene laktosefermentorer (P-G+) fra ikke-laktosefermentorer (P-G-).
(a) Citrobacter (+) og Salmonella arizonae (+) fra Salmonella (-).
(b) Escherichia coli (+) fra Shigella sonnei (-).
Hvorfor ble ONPG-analysen utført ved bruk av en kultur over natten på 3 % natriumklorid jerntrisakkarid (jerntrisakkarid)?Vårt firma har konsultert mye informasjon, men det er ingen klar uttalelse.Bare på FDA-nettstedet står det skrevet at "Inokuler kulturer som skal testes på trippel sukkerjernagarskråninger og inkuber i 18 timer ved 37°C (eller annen passende temperatur, hvis nødvendig). Næringsstoff (eller andre) agarskråninger som inneholder 1,0 % laktose kan også brukes."betyr: testbakteriene ble inokulert på trisakkaridjernmediet og dyrket ved 37°C i 18 timer.Næringsagarskrå (eller annet) medium som inneholder 1 % laktose er også akseptabelt.Derfor utledes det at trisakkaridjernmediet inneholder laktose.Etter vekst over natten har bakteriene produsert en god aktiv β-galaktosidase.Ved å bruke slike bakterier kan ONPG dekomponeres av β-galaktosidase raskere.Det eksperimentelle fenomenet er raskere og bedre manifestert.I tillegg er dråpevis tilsetning av toluen og vannbad i 5 minutter alt for å frigjøre β-galaktosidase fullstendig.