Produkter

RØR [piperazin-N,N′-bis(2-etansulfonsyre)] brukes ofte som buffer i biokjemi.Det er en etansulfonsyrebuffer utviklet av Good et al.på 1960-tallet.PIPES har en pKa nær den fysiologiske pH som gjør den nyttig i cellekulturarbeid.Det er dokumentert å minimere lipidtapet ved bufring av glutaraldehydhistologi i plante- og dyrevev. Et buffermiddel med en pKa nær fysiologisk pH.

Antimikrobielt peptid magainin 2 danner porer i lipidmembraner og induserer membranpermeasjon av celleinnholdet.Selv om denne permeasjonen sannsynligvis er hovedårsaken til dens bakteriedrepende aktivitet, er mekanismen for poredannelse fortsatt dårlig forstått.Vi undersøkte derfor i detalj interaksjonen mellom magainin 2 og lipidmembraner ved å bruke enkle gigantiske unilamellære vesikler (GUV).Bindingen av magainin 2 til lipidmembranen til GUV-er økte fraksjonsendringen i arealet av membranen, δ, som var proporsjonal med overflatekonsentrasjonen av magainin 2, X. Dette indikerer at hastighetskonstanten til magainin 2-induserte to -tilstandsovergang fra intakt tilstand til poretilstand økte kraftig med en økning i δ.Spenningen av en lipidmembran etter aspirasjon av en GUV aktiverte også magainin 2-indusert poredannelse.For å avsløre plasseringen av magainin 2, ble interaksjonen mellom karboksyfluorescein (CF)-merket magainin 2 (CF-magainin 2) med enkelt GUV som inneholdt en vannløselig fluorescerende probe, AF647, undersøkt ved bruk av konfokal mikroskopi.I fravær av spenning på grunn av aspirasjon, etter interaksjonen av magainin 2, økte fluorescensintensiteten til GUV-kanten på grunn av CF-magainin 2 raskt til en stabil verdi, som forble konstant i lang tid, og ved 4-32 s før starten av lekkasje av AF647 begynte felgintensiteten å øke raskt til en annen jevn verdi.I motsetning til dette, i nærvær av spenningen, ble det ikke observert noen økning i felgintensitet rett før lekkasjen startet.Disse resultatene indikerer at magainin 2 ikke kan translokere fra det ytre til det indre monolaget før like før poredannelse.Basert på disse resultatene konkluderer vi med at en magainin 2-indusert pore er en strekkaktivert pore og strekningen av det indre monolaget er en hoveddrivkraft for poredannelsen.