Produkter

Denne studien beskriver en enkel og effektiv metode som benytter høyytelses væskekromatografi (HPLC) koblet til fluorescensdeteksjon for bestemmelse av kinetiske parametere for glutamatopptak i nervevev.Retinalvev oppnådd fra 7 dager gamle kyllinger ble inkubert med kjente konsentrasjoner av glutamat (50-2000 μM) i 10 minutter, og nivåene av o-ftaldehyd (OPA)-derivatisert nevrotransmitter i inkubasjonsmediet ble målt.Ved å vurdere forskjellen mellom start- og sluttkonsentrasjoner av glutamat i mediet, ble en mettbar opptaksmekanisme karakterisert (K(m)=8,2 og V(max)=9,8 nmol/mg protein/min).Dette tiltaket var i stor grad natrium- og temperaturavhengig, og støtter sterkt at mekanismen for konsentrasjonsreduksjoner faktisk er opptak av høyaffinitetstransportører.I tillegg til dette viste resultatene våre også at sinkklorid (en hemmer av glutamat/aspartattransportører) fremkalte en konsentrasjonsavhengig reduksjon i glutamatopptaket, noe som viser spesifisiteten til metodikken vår.Samlet sett karakteriserer dette arbeidet en alternativ metodikk for å evaluere glutamatopptak i nervevev ved bruk av HPLC.Denne tilnærmingen kan være et viktig verktøy for studier knyttet til karakterisering av små endringer i glutamattransport relatert til sentralnervesystemskade.