Produkter

Indolamin 2,3-dioksygenase (IDO1) og tryptofan 2,3-dioksygenase (TDO) er to strukturelt forskjellige enzymer som har ulik vevsfordeling og fysiologiske roller, men begge katalyserer omdannelsen av tryptofan til N-formylkynurenin (NFK).IDO1 har blitt klinisk validert som et lite molekylært medikamentmål for kreft, mens prekliniske studier indikerer at TDO kan være et mål for kreftimmunterapi og nevrodegenerativ sykdom.Vi har utviklet en high-throughput screeninganalyse for IDO1 og TDO basert på en ny kjemisk probe, NFK Green, som reagerer spesifikt med NFK for å danne et grønt fluorescerende molekyl med en eksitasjonsbølgelengde på 400 nm og en emisjonsbølgelengde på 510 nm.Vi gir den første side-ved-side-sammenligningen av en rekke publiserte hemmere av IDO1 og TDO og avslører at den prekliniske IDO1-hemmeren forbindelse 5l viser signifikant kryssreaktivitet med TDO, mens den relative selektiviteten til andre publiserte hemmere ble bekreftet.Egnetheten for high-throughput-screening av analysene ble demonstrert ved å screene et bibliotek med 87 000 kjemiske stoffer i 384- eller 1536-brønners format.Til slutt demonstrerer vi at analysen også kan brukes til å måle kapasiteten til cellene til å metabolisere tryptofan og for å måle den cellulære styrken til IDO1- og TDO-hemmere.