Produkter

Karbonanhydraseaktivatorer: den første aktiveringsstudien av den humane sekretoriske isoformen VI med aminosyrer og aminer.

Det sekretoriske isozymet til human karbonanhydrase (hCA, EC 4.2.1.1), hCA VI, er blitt klonet, uttrykt og renset i et bakterielt ekspresjonssystem.De kinetiske parameterne for CO(2)-hydreringsreaksjonen viste at hCA VI hadde ak(cat) på 3,4 x 10(5)s(-1) og k(cat)/K(M) på 4,9 x 10(7)M (-1)s(-1) (ved pH 7,5 og 20 grader C).hCA VI har en betydelig katalytisk aktivitet for den fysiologiske reaksjonen, av samme størrelsesorden som den allestedsnærværende isoformen CA I eller det transmembrane, tumorassosierte isozymet CA IX.En serie aminosyrer og aminer ble vist å fungere som CA VI-aktivatorer, med varierende effektivitet.l-His, l-Trp og dopamin viste svake CA VI-aktiverende effekter (K(A)s i området 21-42 mikroM), mens d-His, d-Phe, l-DOPA, l-Trp, serotonin , og noen pyridyl-alkylaminer var bedre aktivatorer, med K(A)s i området 13-19 mikroM.De beste CA VI-aktivatorene var l-Phe, d-DOPA, l-Tyr, 4-amino-l-Phe og histamin, med K(A)s i området 1,23-9,31 mikroM.Alle disse aktivatorene forsterker k(cat), og har ingen effekt på K(M), og deltar dermed i det hastighetsbestemmende trinnet i den katalytiske syklusen, protonoverføringsreaksjonene mellom enzymets aktive sted og miljøet.