Produkter

CTP: fosfokolin cytidylyltransferase α (CCTα) er et kjernefysisk enzym som katalyserer det hastighetsbegrensende trinnet i CDP-kolin-veien for fosfatidylkolin (PC) syntese.Lipidaktivering av CCTα resulterer i dens translokasjon til kjernekappen og utvidelse av et intranukleært membrannettverk kalt nukleoplasmatisk retikulum (NR) av en mekanisme som involverer membrandeformasjon.Kjernefysiske laminer er også nødvendige for stabilitet og spredning av NR, men om denne unike strukturen, eller kjernefysisk lamina generelt, er nødvendig for PC-syntese er ikke kjent.For å undersøke dette forholdet ble kjernefysiske lamina uttømt av RNAi eller forstyrret ved uttrykk av Hutchinson-Gilford progeria syndrom (HGPS) mutant lamin A (progerin), og effekten på CCTα og kolinmetabolisme ble analysert.siRNA-mediert demping av lamin A/C eller lamin B1 i CHO-celler for å redusere NR hadde ingen effekt på PC-syntese, mens dobbel knockdown ikke-spesifikt hemmet banen.For å bekrefte hans mindre rolle i PC-syntese ble bare 10 % av forbigående overuttrykt kolin/etanolamin-fosfotransferase påvist i NR.I CHO-celler var CCTα nukleoplasmatisk og samlokalisert med GFP-progerin i kjernefolder og invaginasjoner;Imidlertid viste HGPS-fibroblaster en unormal fordeling av CCTα i cytoplasmaet og kjernekonvolutten som ble ledsaget av en 2 ganger reduksjon i PC-syntese.Til tross for den endrede lokaliseringen, viste kolinmerkingseksperimenter at CCT-aktivitet var upåvirket, og hemming av PC-syntese ble sporet til redusert aktivitet av en hemicholinium-sensitiv kolintransportør.Vi konkluderer med at CCTα og laminer spesifikt samarbeider for å danne NR, men den generelle strukturen til kjernefysiske konvolutten har en minimal innvirkning på CCT-aktivitet og PC-syntese.